안녕하십니까, CND 관리자입니다. 이번시간에는 oncolytic virus를 이용한 adoptive cell therapy (ACT)에 대해 알아보겠습니다. 기존 사용되어왔던 ACT는 tumor-infiltrating lymphocytes (TILs)를 통해 이루어지는데, 종양에서의 TILs의 분리는 쉽지 않고 분리되는 양도 적었습니다. 본 문헌에서는 IL2를 재조합한 바이러스를 종양에 투여한 뒤, 투여한 종양에서 TILs을 분리하여 ACT에 사용했습니다. 그 결과, 바이러스를 투여하지 않은 종양/비장에서의 TILs을 분리하여 투여했을 때 보다 효과가 큰 것을 확인했습니다. 더 자세한 내용은 하단의 문헌을 확인해주시기 바랍니다. 감사합니다.

안녕하십니까, CND 관리자입니다. 이번 시간에는 신약 개발 단계에서 고려해야할 요소인 drug-drug interation (DDI)에 대한 FDA 가이드라인을 소개하겠습니다. DDI는 한 약물의 효과 혹은 PK가 이전에 복용하거나 병용 투여된 다른 약물에 의해 달라지는 현상을 말합니다. 신약개발단계에서 다른 모든 약물들에 대한 상호작용을 평가하는 것은 현실적으로 불가능하기 때문에, DDI가 발생함으로써 전신적인 영향(systemic effect)이 있는지, 얼마만큼의 위험부담(risk-based)이 있는지 등의 접근 방식이 중요합니다. 비임상 단계에서 DDI를 평가하는 시험은 크게 in vitro와 in vivo 로 나눌 수 있는데, 전자의 경우 cytochrom P450 enzyme이 중요한 역할을 하고, 후자의 경우 동물모델을 활용한 ADME (absorption, distribution, metabolism and excretion) 및 독성 평가가 주로 행해집니다. 하단에 첨부된 가이드라인을 참고하시어, FDA에서 어떻게 DDI 평가할 것을 권하는지, 관련 시험은 어떻게 행해져야 하는지 등에 대해 알아보는 유익한 시간되시길 바랍니다. 감사합니다.

안녕하십니까. CND관리자입니다. 이번 시간에는 바이러스 및 1형 인터페론에 의한 T cell proliferation에 대해 살펴보고자 합니다.  생체 내에서 T cell proliferation은 다양한 환경 항원에 대한 T세포 수용체(TCR) 매개 다클론반응을 반영하는 것으로 추정됩니다. 그러나 바이러스 감염에서 보이는 T세포의 대량 증식은 TCR대신 사이토카인에 의한 방관자(Bystander) 반응을 암시합니다. 마우스에서, 바이러스 감염을 일으켰을 때, CD8+세포의 CD44(hi) subset에 우선적으로 영향을 미치고 1형 인터페론(IFN1)의 유도제인 [poly(I:C)]의 주입에 의해 모방되었습니다. 정제된 IFN1에 의해 이런한 증식은 CD69 혹은 CD25발현의 상하조절과 관련이 없었으며, 이는 TCR 신호 전달이 관련되지 않았음을 의미합니다. IFN[poly(I:C)] 자극된 CD8세포는 생체 내에서 장기간 생존하고 항원 특이적 CD8+세포와 동일한 표현형을 나타냈다고 합니다. IFN1은 또한 특정항원에 반응하는 CD8+세포의 클론 확장 및 생존을 강화했습니다. 더 자세한 내용은 첨부파일을 확인해주시기 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까 CND 관리자입니다. 이번시간에는 유전자치료제 중 하나인 항암바이러스 치료제의 독성평가와 관련한 저널을 살펴보고자합니다. Shedding은 바이러스/벡터가 환자의 배설물이나 분비물을 통해 퍼지는 것을 의미합니다.  Biodistribution은 투여 부위로부터 환자 체내에서 바이러스가 확산되는 것을 말합니다. Transmission은 바이러스를 투여 받은 환자와 close contact에 있는 healthcare workers에 대한 바이러스의 이동 가능성을 의미합니다. 환경적, 공중보건적, 환자의 안전에서 바이러스 치료제의 이러한 측면을 평가하는 것은 굉장히 중요하겠습니다. Talimogene laherparepvec (T-VEC)은 수술 후 재발한 흑색종의 치료에 사용되는 약제로, 수술로 제거할 수 없는 피부와 림프절에 암이 있는 환자에서 사용되며, 헤르페스 바이러스를 실험실에서 정상세포에 손상 없이 암세포만 파괴할 수 있는 형태로 변화시켜 암을 죽일 수 있도록 만든 바이러스 입니다. 현재 개발중인 바이러스 치료제 중에서 임상이 진행중인 약물입니다. 다음의 자료에서 임상 중 확인한 T-VEC oncolytic virus 치료제의 독성 평가 사례에 대해서 살펴보시며 유익한 시간 보내시길 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까, CND 관리자입니다. 이번 시간에는, 포르말린 고정된 파라핀 블럭으로 만들어 H&E 염색하여 보관 중인 슬라이드를 추가적인 분석에 이용하는 방법을 소개하고자 합니다. 보통 슬라이드 제작은, serial section을 이용하여 각각의 단면을 다른 염색을 하는 방식으로 이루어지게 됩니다. 하지만, 이러한 방법을 사용한 경우, serial section한 단면의 세포들에 portion이 달라지게 됩니다. 심한 경우, 종양 조직이 포함되지 않은 section이 나타날 수도 있습니다. 이에, H&E 염색한 슬라이드에서 H&E 염색을 제거하고, 관심 있는 biomarker에 대한 면역 염색을 실시할 수 있는 방법에 대해 조사하게 되었습니다. 이러한 방식을 이용하여, 보다 종양 진단 및 치료 target 분석에 대한 효과적인 tool이 되지 않을까 합니다. 오늘도 유익한 시간 되시기를 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까, CND관리자입니다. 이번 시간에는 flow cytometry를 이용한 혈소판의 기능 검사에 대해 소개하겠습니다. 본 문헌에서는 혈소판 표면 단백질의 마커를 이용하여 백혈구 종류에 따라 응집되는 비율을 확인했습니다. 신약개발 과정에서 혈소판 기능을 스크리닝할 수 있는 시험법 중 하나로 관련 연구를 하시는 분들에게 도움이 되시길 바랍니다. 자세한 내용은 하단의 문헌을 참고하시길 바랍니다. 감사합니다.

안녕하십니까, CND관리자입니다. 이번 시간에는 NAFLD/NASH를 조직병리학적으로 진단함에 있어서 동물 종/샘플링 부위에 따른 variation에 대해 설명한 논문을 소개하고자 합니다. 본 문헌에서는 C57BL/6 mice, SD rats, guinea pigs를 각 8마리씩 이용해 분석하였고, 특히 NASH 연구에 가장 많이 이용되는 C57BL/6 mice의 경우 left lateral lobe, right medial lobe, caudate lobe등을 각각 구분하여 sampling한 후 NAS scoring한 결과를 제시하였습니다. sampling하는 lobe에 따라 결과가 달라질 수 있다는 점을 참고하여 관련된 연구를 진행하시는 연구자분들께 도움이 되는 자료이길 바랍니다. 감사합니다.

안녕하십니까. CND관리자입니다. 이번 시간에는 바이러스의 EEV에 관련된 논문을 소개해드리고자 합니다. 바이러스는 extracelular enveloped virus(EEV), 즉  세포 밖 껍질 보유 바이러스가 있습니다. 이 EEV에 관련된 5가지 gene으로서, A56R, F13L, A34R, B5R, A36R등이 있습니다. 위 논문에서는 WR, vSAD9 strain virus에 A34R gene을 deletion시킨것과 시키지 않은 것, 그 위치가 TK인 것과 그렇지 않은 군으로 나누어 실험을 진행했습니다. 그 결과 EEV가 얼마나 증감했는지, 바이러스 activity는 어떻게 달라졌는지 등에 대한 내용을 다루고 있습니다. 더 자세한 사항은 첨부파일의 논문을 참고해주시기 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까. CND 관리자입니다. 이번 시간에는 식품의약품안전평가원에서 제공하고 있는 치료용 DNA 백신의 품질 및 비임상시험 평가 가이드라인에 대해서 살펴보고자 합니다. 면역반응을 유도하거나 활성화하는 하나 이상의 DNA 서열을 함유하는 정제된 플라스미드를 대상으로, 이를 DNA 백신으로 정의합니다. 현재 DNA 백신은 DNA 백신 단독 사용에 한정하지 않고 바이러스 벡터나 단백질 항원으로 추가 면역하거나 싸이토카인이나 T세포의 다양한 항원 결정기를 암호화하는 플라스미드 DNA와 함께 주입하는 경우, 보조제를 사용하여 DNA가 세포 안으로 들어가게 하거나 면역 반응을 일으키게 하는 등 다양하게 개발되고 있습니다. 소개드린 가이드라인에서는 이려한 'DNA 백신'을 이용하여 임상시험 승인 신청 및 품목허가를 위한 품질 및 비임상 시험 제출자료를 준비할 때 필요한 세부 사항들을 제시하고 있습니다. 다음의 자료를 살펴보시며 유익한 시간 보내시길 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까. CND 관리자입니다. 이번 시간에는 신장 질환에 대한 동물 모델들을 소개하고자 합니다. 신장 질환은 크게 급성 (Acute Kidney Injury, AKI)와 만성 (Chronic kidney disease)로 나눌 수 있습니다. 두 질환의 양상이 다르므로, 이를 유도하는 동물 모델들 또한 종류가 다릅니다. 소개해드린 paper에는 급성과 만성 신장 질환에 대한 주요 동물 모델들과 장단점을 소개하고 있습니다. 오늘도 유익한 시간 되시기를 바랍니다. 감사합니다.        

안녕하십니까, CND 관리자입니다. 이번시간에는 Cytokine release syndrome에 대해 알아보겠습니다. 최근 개발되는 면역항암제는 immune check point inhibitor, chimeric antigen receptor (CAR) T cell등이 사용되고 있고, 임상에서도 큰 효과를 주고있어 많이 각광받고 있습니다. 하지만 강력한 면역 치료 효과로 인해 오히려 부작용으로 cytokine release syndrome이 생길 수 있습니다. Cytokine release syndrome은 면역을 과하게 증가시키는 약물 치료로 인해 T cell stimulation이 과다하게 일어나 cytokine storm이 일어나게 되며 나타나는 전신 염증작용입니다. Cytokine release syndrome의 부작용으로는 mild하게는 발열, 발진, 관절통, 근육통 등이 일어날 수 있지만, 심각한 경우 전신 장기의 기능 부전 및 사망까지도 이를 수 있습니다.  cytokine release syndrome에 대해 더 자세한 내용은 아래 문헌을 참고하시길 바랍니다. 감사합니다.

안녕하십니까, CND 관리자입니다. 이번시간에는 NASH의 biomarker로써 역할을 하는 VAP-1 (Vascular Adhesion Protein-1)을 소개하는 시간을 가져보겠습니다. NAFLD (Non-Alcoholic Fatty Liver Disease, 비알코올성지방간)는 음주력이 없는 사람의 간에 지방이 과도하게 축적되어 발병하는 질병입니다. Simple Steatosis (단순 지방간)와 NASH (비알코올성지방간염)로 구분할 수 있는데, 전자는 간경변(Liver Cirrhosis)으로 진행되지 않아 임상적 예후가 좋은 반면, 후자는 간기능 저하, 간경변, 간암 등을 일으킬 수 있는 질환으로 발병 후 5년 생존율이 67%이며 현재 NASH치료를 위해 허가된 약물이 없는 상황입니다. 이에 따라, 글로벌 제약사들에서 NASH 치료 약물 개발에 몰두하고 있으며, VAP-1에 특이적인 저해제(inhibitor)가 NASH치료 효능이 검증되어 주목받고 있습니다. 아래 첨부한 문헌을 통해 VAP-1이 어떠한 원리로 NASH의 biomarker로써 쓰일 수 있고, 이에 대한 저해제가 어떻게 치료제로써 기능을 할 수 있는지 생각해보는 시간을 가져보면 좋을 것 같습니다. 감사합니다.

안녕하십니까. CND 관리자입니다. 이번 시간에는 CCR5-CCL5 axis가 NK세포가 tumor site로 homing하는데 중요하며, 이것을 vaccinia virus를 이용했을 때 항종양효과를 더욱 높일 수 있다는 내용을 담고 있는 논문을 소개해드리고자 합니다. 항암치료를 위해 사용되고 있는 NK세포는 종양 부위로 들어가기는 하지만, 말초혈액에 남아있기 때문에 고형종양을 가진 환자들에게 제한적으로 사용되고 있습니다. 이때 NK세포의 분포에 영향을 주는 케모카인 및 수용체들을 이용하여 NK세포의 치료 효능을 높일 수 있을 것이라는 가설에 대한 증명을 위해 lentivirus와 oncolytic virus를 이용하여 실험을 진행한 논문 입니다. 요약해서 말씀드리자면, CCL5가 재조합된 virus를 malignent cell에 in vitro로 주입했을때 복제효율 및 viability가 일반 virus와 비교했을때 비슷한 정도의 수준으로 유지됨을 확인하고, Tumor cell에서 CCR5발현 NK세포의 정도가 높으며  이것에 CCL5에 의한 것임을 확인했습니다. 또한 In vivo데이터 상에서도,  CCL5가 재조합된 바이러스를 주입했을 때 tumor growth를 늦추고 생존기간을 늘렸다고 합니다. 더 자세한 사항은 첨부파일을 참고해주시기 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까 비임상개발센터입니다. 이번 시간에는 Tumor necrosis factor-α 가 마우스 폐 조직의 tight junction에 미치는 영향에 대해서 알아보고자 합니다. TNF-α는 체내 발열원으로써, 열이 나게 유도하거나, 세포 자살을 유도하거나, IL-1과 IL-6의 생산을 통해 패혈증을 유발하거나, 악액질을 유도하거나, 감염을 유발하며 종양생성과 바이러스 복제를 억제하는 역할을 합니다. 본 연구에서 TNF-α을 억제하니, pleural exudate와 폐 조직에서의 TNF-α 생성과 inflmmatory cell infiltration이 감소되는 것을 확인할 수 있었습니다. 마찬가지로, immunohistochemistry 염색을 통해 세포의 tight junction에 관여하는 ZO-1, Claudin-2, Claudin-4, Claudin-5, β-catenin 의 발현 양상이 변화됨을 확인할 수 있었으며, apoptosis 비율에도 차이를 보였습니다. 이것으로 Tumor necrosis factor-α inhibition이 폐조직의 tight junction permeability를 감소시킨다는 점을 알 수 있었고, TNF-α가 폐포벽의 기능에도 영향을 준다는 것을 시사하고 있습니다. 논문을 읽어보시며 유익한 시간 보내시길 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까. CND 관리자입니다. 이번 시간에는 In vitro methods for testing antiviral drugs라는 논문을 소개하고자 합니다. 성공적인 백신 및 일부 바이러스에 대한 효과적인 치료법이 개발되었음에도 불구하고, 현재 COVID-19를 비롯하여 여러가지 바이러스의 위험이 남아있습니다. 또한 약물에 대한 내성 변종의 발생은 새로운 항바이러스제에 대한 개발이 지속적으로 필요로 하고 있습니다. 따라서 새로운 항바이러스제의 효능 확립을 위한 초기 단계가 중요하다고 할 수 있습니다. 이에 임상적으로 중요한 바이러스의 억제 활동을 평가하는 생화학 및 세포 기반 검사의 개요를 소개하고자 합니다. 자세한 내용은 첨부한 논문을 참고 부탁드립니다. 감사합니다.